Mutant ZP1 w rodzinnej niepłodności AD 5

(Nieututowane białko składa się z 638 aminokwasów.) Poprzednie badania wykazały, że ZP1 ma cechy pozostałych trzech białek pellucida, 5,18 z 34% dla ZP2, 23% dla ZP3 i 46% dla ZP4. Oczekuje się, że skrócone białko ZP1 będzie zawierało N-końcową sekwencję sygnałową, domenę koniczyny i pierwszą połowę domeny pelelocytów. Inne domeny, takie jak zewnętrzna łatka hydrofobowa, miejsce rozszczepienia konsensusowej furiny, domena transbłonowa, ogon cytoplazmatyczny i druga połowa domeny pelelowej strefy zona są prawdopodobnie nieobecne (Figura 3C) .1,19,20 Brak Zona Pellucida w zmutowanych Oocytach
Po rozmrożeniu czterech zamrożonych jaj od piątej siostry odzyskałyśmy dwa. W przeciwieństwie do wyników uzyskanych w jajach uzyskanych z kontroli, nie wykryto żadnych dowodów na zewnątrzkomórkowe ZP1 lub ZP3 w dwóch rozmrożonych jajach na podstawie analizy immunofluorescencyjnej lub mikroskopii konfokalnej. ZP3 i mutant ZP1 wykazywały rozproszone wybarwianie w jajach od piątej siostry, w przeciwieństwie do zatężonego barwienia ZP3 i niezmutującego ZP1 w pobliżu obrzeża nienaruszonych komórek jajowych. Scalone obrazy wykazały kolokalizację sygnałów ZP1 i ZP3 w cytoplazmie w jajach pacjenta, podczas gdy kolokalizacja tych sygnałów była obserwowana tylko w pobliżu błony komórkowej i w matrycy zona normalnych komórek jajowych (Figura 2B i Fig. S4 w Dodatkowym Dodatku ).
Dyskusja
Wykryliśmy autosomalny recesywny wzór dziedziczenia dla homozygotycznej delecji w ZP1 u niektórych członków rodziny dotkniętych niepłodnością. Nasze dane sugerują, że mutacja zapobiega tworzeniu się otoczki wokół komórek jajowych: wszystkie obserwowane komórki jajowe od dotkniętych członków rodziny nie miały otoczki przejrzystej po zbadaniu pod mikroskopem świetlnym (Figura 1D i 1E, i Figura 2B). W oocytach z członków rodziny IV-5 nie zaobserwowaliśmy ekspresji ZP1 i ZP3 w regionie zwykle zajmowanym przez matrycę zona (ryc. 2B). Wnioskujemy zatem, że oocyty z dotkniętych członków rodziny nie miały matrycy zona, co stanowiło przyczynę niepłodności.
Kosegregacja między mutacją I390fs404X w ZP1 i niepłodnością wspiera, ale nie dowodzi związku przyczynowego. Nie zmutowany ZP1 zawiera 638 aminokwasów, z których 270 tworzy domenę pelelocytów zona, moduł agregacji białek obejmujący aminokwasy 279 do 54918,21; przewiduje się, że mutacja rozbije tę domenę, a jednocześnie pozwoli na interakcję między zmutowanym białkiem ZP1 i innymi białkami pellucida (ZP2, ZP3 i ZP4). 22 Oczekiwano jednak utraty domen C-końcowych w mutancie ZP1. w celu zniesienia podstawowych funkcji normalnych, takich jak C-końcowe cięcie, 19 lokalizacji transbłonowej, 23 zespołów, 20 zapobieganie wewnątrzkomórkowej polimeryzacji, 12 i handel białkiem zarówno wewnątrzkomórkowo, jak i na zewnątrz jajeczka.
W modelach myszy wykazano, że oocyty wydzielają tylko trzy białka pellucida (ZP1, ZP2 i ZP3) i zaproponowano, że otoczka zonae myszy i ludzi ma podobną strukturę.13 U myszy długie włókna powtarzanie jednostek ZP2-ZP3 jest usieciowane przez ZP1 (który ma 70% homologii z ludzkim ZP1) w celu utworzenia matrycy podobnej do siatki.13 Całkowite wyeliminowanie Zp2 lub Zp3 u samic myszy prowadzi do niepłodności, z jajami pozbawionymi pelelocytów zona, 6,7, który jest podobny do opisanego tu fenotypu
[patrz też: świadome śnienie forum, przychodnia na batorego, gonartroza leczenie ]

Powiązane tematy z artykułem: gonartroza leczenie przychodnia na batorego świadome śnienie forum